タンポポ2005_2004予備調査・サンプル処理マニュアル（修正版）

タンポポ調査・近畿2005 予備調査実施要項
「調査用紙・頭花・痩果サンプル処理マニュアル」（修正版）

註

・このマニュアルは、近畿全体で統一して行なう最低限の処理方法です。
・各府県独自に、これ以外のデータ処理を行なっていただいても結構です。
・なお、訂正や追加は、調査者の記載事項と区別するために、すべて赤ペンで行なうこととします。
(1) 送付された封筒の扱い
    @ 送付されてきた封筒は所定の箱に入れておき、紛失しないように注意する。その際、気密性の高い箱ではサンプルが蒸れてしまうので、ダンボールなど紙製のものが望ましい。

    A 各府県別に予めデータの処理体制を確立し、一定の期間(できるだけ1週間以内)ごとに、送付されてきた封筒を処理する。原則として、調査場所が他府県でも送付された封筒はその府県で処理する。ただし、大量に誤って送れられてきた場合は、該当する府県の実行委員会に転送してもよい。

    B 処理の方法を理解した担当者が、送られてきた封筒を開き、「通し番号」(この番号はあとの集計には利用しないので各府県独自に使ってもよい)を打つ。
(2) 小袋の処理
    @ 小袋を開いて調査用紙と小袋用紙の所定の欄に下記の要領で「整理番号」(この番号を 近畿全体の処理に使うので下記の要領を必ず守ってください)を記入する。
      ＜整理番号の打ち方＞
      1) １ケタ目は下記の府県番号(政府の全国統計の府県順)とする。
      （１：三重、２：滋賀、３：京都、４：大阪、５：兵庫、６：奈良、７：和歌山） 2) ２ケタ目〜５ケタ目は処理をした順に「０００１」から順に番号を打つ。例えば、三重県の１番目のサンプルは「１０００１」となる。
      3) このとき、同じ整理番号のものができないように注意する(「処理日誌」を作って、いつ・だれが・整理番号が何番〜何番までの調査用紙を処理したかを記録しておくなどするとよい。また、欠番はできてもよい)。
    A タンポポの頭花標本が入っていない場合や、間違ってタンポポ以外の花を入れている場合も整理番号を打つ。

    B もしも、１つの封筒に頭花が２個以上入っていて、それらの種類が異なる場合は、別の小袋に入れ直して、小袋ごとに上記の方法で「整理番号」を打っていく。
    その際、例えば３種類の頭花が入っていた場合は、調査用紙を２部コピーし、別の整理番号を打つことになる。
(3) 「２．調査した場所」の記入
    @ 調査場所のメッシュ番号が記入されていない場合は、住所を元にしてＨＰで検索するか、旧環境庁作成の「都道府県別メッシュマップ」や国土地理院の地形図・市販の都市地図などを併用して、その地点のメッシュ番号を調べ、朱字で記入する。

    A 記入された住所からでは、３次メッシュ番号(８ケタ)を特定できない場合は、２次メッシュ番号(６ケタ)まででもよいので、わかる範囲でメッシュ番号を調べる。
(4) 「４．タンポポの種類」の確認
    @ タンポポの頭花(と痩果)を用いて、種類の確認を行ない、調査用紙の記載(４.の@・A・B)が正しければ、４.タンポポの種類の「４」の数字を赤○で囲んでおく。

    A 頭花が添付されていない場合は、「４．タンポポの種類」の右横に「花なし」と朱記する。また、痩果が貼付されている場合は「タネあり」と朱記する。

    B また、タンポポ以外の植物(ノゲシやブタナなど)が入っていた場合は、４．タンポポの種類の余白に、「ノゲシ」「ブタナ」のようにその植物名を記入する。不明の場合は、「種類不明」と記入する。
    C 標本の観察から、調査用紙の種類の欄の○の位置が間違っていることがわかれば、その○の上に赤ペンで×印をつけ、正しい欄に赤○をつける。

    D 「@在来種」について、種名まで確認できる場合は、その種名を@在来種の［　　］の右横に「カンサイタンポポ」のように朱記する。

    E「A外来種」については、痩果（タネ）があればそれで種名が正しいかどうかを確認し、間違っていれば赤字で訂正する。タネがない場合やタネがあっても種類がわからない場合は、ｃ．に○をつける。

    F「Cわからない」に○があれば、頭花や痩果を調べて、その結果を朱記する。
(5) 花粉の観察による「４．タンポポの種類」のチェック
    @ 総苞外片の状態の記載が「１」「２」「３」の場合は、すべて花粉のチェックを行なう。また、「４」「５」の場合も原則として花粉の観察を行うものとするが、標本数が多すぎて困難な場合は、６月５日のサンプル検討会で相談して下さい。

    A 頭花の中央部をスライドガラスに押し付けて花粉を採取し、顕微鏡(100〜400倍)、または双眼実体顕微鏡で観察する。
    このとき、「スティックのり」や「グリセリン」をスライドガラスにぬって、その上に頭花を押し当てると花粉が付着しやすい。
    カバーガラスをかけておけば長くおいても観察できる。
    花粉が少ない場合は、頭花を２つに割って中央部をスライドガラスにこすりつける。

    B 花粉観察の結果は、次のいずれかに判断して、４．タンポポの種類の右下の空欄に、「〇〇」の字句を朱記しておく。
    　　　Ａ．花粉はほぼ同じ大きさで均一(２倍体の在来種)。→「花粉均一」
    　　　Ｂ．大きいものや小さいものがあり、花粉の大きさはバラバラ。→「花粉バラバラ」
    　　　Ｃ．花粉を探してもみつからない。→「花粉なし」
    　　　Ｄ．花粉らしいものがあるが、少なくてはっきりわからない。→「花粉不明」
(6) 処理後の頭花や痩果の扱い
    @ 観察後の頭花は、再びティッシュペーパーで包み、もとの小袋に戻す。

    A 調査用紙の確認が終了すれば、小袋用紙の口をホッチキスで止めて、小袋の外側にも整理番号を朱記し、小袋を整理番号順に並べて一定数ごとに大きな紙袋に入れ、冷蔵庫内で保存する(痩果の一部は発芽させてＤＮＡ量測定等に使う予定だが、長期間室温で保存すると発芽率が低下するため)。
(7) 調査用紙の記載事項の入力
    @ 調査用紙のすべての項目について確認が終われば、調査用紙の記載事項をエクセルのワークシート(各府県事務局へ添付ファイルで送付)に入力する。
    A 入力の書式はそのワークシートの記入例を参照し、列の変更は絶対しないこと。

    参考資料： 花粉による在来種(左)と外来種・雑種など(右)の識別　(同じ倍率)
    　
    　


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